国产免费高清69式视频在线观看丨厨房玩丰满人妻hd完整版视频丨激情亚洲图片激情亚洲小说丨久久国产精品福利一区二区三区丨亚洲精品福利一区二区三区蜜桃

EF52A\J2                      2016-01版

地塞米松

快速檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

一、原理

本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的殘留物地塞米松藥物將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗地塞米松藥物抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物地塞米松藥物的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物地塞米松藥物的含量。

二、試劑盒特性

u 試劑盒靈敏度：   0.1ppb

u 孵育溫度：       25℃

u 孵育時(shí)間：       30min～15min

u 樣本檢測(cè)下限

組    織  ·····································  0.1 ppb

飼    料  ·····································  0.2 ppb

奶    粉  ·····································  0.3 ppb

牛    奶  ·····································  0.2 ppb

蜂    蜜  ·····································  0.2 ppb

尿    樣  ·····································  0.2 ppb

u 交叉反應(yīng)率

地塞米松  ········································· 100%

u 樣本回收率

組  織 、 飼料  ························   90% ±25%

奶  粉   ··································   85% ±25%

尿 樣、牛 奶、蜂蜜  ···················  95% ±25%

三、試劑盒組成

四、所用儀器、試劑

具備的儀器：酶標(biāo)儀、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）、氮吹儀、恒溫箱、打印機(jī)

微量移液器：?jiǎn)蔚?/span> 20～200µl、單道100～1000µl、多道 30～300 µl

試      劑：乙酸乙酯、乙腈、正己烷

五、樣本前處理步驟

u 樣本處理前須知

（a）實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭，吸取不同試劑時(shí)要更換吸頭。

（b）實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈，必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

u 樣本前處理需配制：

配液1   乙腈-乙酸乙酯混合液：

將乙腈與乙酸乙酯按1:1混合

配液2   樣本復(fù)溶液：

將5X濃縮復(fù)溶液用去離子水按1：4稀釋。

u 樣本處理：

（a）組織處理

1、 稱2.0±0.05g 均質(zhì)后的組織樣本于50ml離心管中；加入2ml樣本復(fù)溶液，再加入6ml乙酸乙酯，振蕩3min，4000r/min以上，15℃離心10min；

2、 取3ml清澈有機(jī)相至干燥容器中，50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>

3、 用1ml正己烷溶解干燥的殘留物，再加入樣本復(fù)溶液1ml，混合30s，4000r/min以上15℃離心10min；去除上層正己烷；

4、 取下層50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數(shù):  1倍 

（b）飼料處理方法

1、 稱1.0±0.05g 粉碎后的飼料樣本于50ml離心管中；加入6ml乙酸乙酯，振蕩3min，4000r/min以上，15℃離心10min；

2、 取3ml清澈有機(jī)相至干燥容器中，50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>

3、 用1ml正己烷溶解干燥的殘留物，再加入樣本復(fù)溶液1ml，混合30s，4000r/min以上15℃離心10min；去除上層正己烷；

4、 取下層50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數(shù):  2倍

（c）奶粉處理方法

1、 稱1.0±0.05g 奶粉樣本于50ml離心管中，加入2ml樣本復(fù)溶液，再加入6ml乙腈-乙酸乙酯混合液，振蕩3min，4000r/min以上，15℃離心10min；

2、 取2ml清澈有機(jī)相至干燥容器中，50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>

3、 用2ml正己烷溶解干燥的殘留物，再加入樣本復(fù)溶液1ml，混合30s，4000r/min以上15℃離心10min；去除上層正己烷；

4、 取下層50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數(shù):  3倍

(d）蜂蜜處理方法

1、 稱1.0±0.05g 蜂蜜樣本于50ml離心管中，加入2ml樣本復(fù)溶液，再加入6ml乙酸乙酯，振蕩3min，4000r/min以上，15℃離心10min；

2、 取3ml清澈有機(jī)相至干燥容器中，50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>

3、 用1ml正己烷溶解干燥的殘留物，再加入樣本復(fù)溶液1ml，混合30s，4000r/min以上15℃離心10min；去除上層正己烷；

4、 取下層50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數(shù): 2倍

（e）尿樣處理方法

1、 取1.0ml 尿樣樣本于5ml離心管中，加入2ml乙酸乙酯，振蕩1min，4000r/min以上，15℃離心10min；

2、 取1ml清澈有機(jī)相至干燥容器中，50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>

3、 用1ml正己烷溶解干燥的殘留物，再加入樣本復(fù)溶液1ml，混合30s，4000r/min以上15℃離心10min；去除上層正己烷；

4、 取下層50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數(shù): 2倍

（f）牛奶處理方法

1、 取1.0ml 牛奶樣本于5ml離心管中，加入2ml乙腈-乙酸乙酯混合液，振蕩1min，4000r/min以上，15℃離心10min；

2、 取1ml清澈有機(jī)相至干燥容器中，50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>

3、 用1ml正己烷溶解干燥的殘留物，再加入樣本復(fù)溶液1ml，混合30s，4000r/min以上15℃離心10min；去除上層正己烷；

4、 取下層50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數(shù): 2倍

六、 酶標(biāo)免疫分析程序:

u 測(cè)定前應(yīng)須知：

1、 使用前將需用試劑和板條的溫度回升至室溫（20～25℃）。

2、 使用之后立即將所有試劑放回2～8℃。

3、 在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的一致性，正確的洗板操作是ELISA測(cè)定程序中的要點(diǎn)。

4、 所有恒溫孵育過(guò)程，避免光線照射，用蓋板膜蓋住微孔板。

u 操作步驟：

1、 從2～8℃冷藏環(huán)境中取出所需試劑，室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2、 取出框架及需要數(shù)量的微孔，將不用的微孔放入自封袋，保存于2～8℃。

3、 配液：將15ml濃縮洗滌液（20倍濃縮）用去離子水按照1：19稀釋（1份濃縮洗滌液+19份去離子水），或按所需用量配制洗滌液。

4、 編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

5、 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶標(biāo)記物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗體工作液，用蓋板膜蓋板，輕輕振蕩混勻，25℃環(huán)境反應(yīng)30min。

6、 將孔內(nèi)液體甩干，用已稀釋的洗滌液250µl/孔洗板4～5次，每次間隔15～30秒，用吸水紙拍干（拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

7、 顯色：加入底物A液50µl/孔，再加入底物B液50µl/孔，輕輕振蕩混勻，25℃環(huán)境中避光顯色15min。

8、 測(cè)定：加入終止液50µl/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處（建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè)，5min內(nèi)讀數(shù)），測(cè)定每孔OD值。

七、結(jié)果判定

結(jié)果判定有兩種方法，粗略判定可用第1種方法，定量判定用第2種方法。注意樣本吸光度值與其所含地塞米松量成負(fù)相關(guān)。

1、粗略判定：

用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍(ng/ml)。假設(shè)樣本1的吸光度值為0.3，樣本2的吸光度值為1.0，標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是：0ppb為2.243； 0.1ppb為1.816；0.3ppb為1.415；0.9ppb為0.74；2.7ppb為0.313；8.1ppb為0.155。則樣本1的濃度范圍是2.7ppb～8.1ppb；樣本2的濃度范圍是0.3ppb～0.9ppb，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中地塞米松實(shí)際濃度。

2、定量分析

（1）百分吸光率的計(jì)算，標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的吸光度值的平均值（雙孔）除以第一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)（0標(biāo)準(zhǔn)）的吸光度值，再乘以100%，即

B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

B₀—0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以地塞米松標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ng/ml）的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中地塞米松實(shí)際濃度。

若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。（歡迎來(lái)電索取）

八、 注意事項(xiàng)

1、 室溫低于25℃或試劑及標(biāo)本未回到室溫（20～25℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

2、 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)伴隨著標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3、 混合要均勻，否則會(huì)出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。

4、 反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。

5、 不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒；稀釋或攙雜使用會(huì)引起靈敏度、OD值變化；不要交換使用不同批號(hào)的盒中試劑。

6、 不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

7、 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。標(biāo)準(zhǔn)品1的吸光度值小于0.5時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。

8、 該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃，溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

九、儲(chǔ)藏條件和保質(zhì)期

1、 儲(chǔ)藏條件：試劑盒于2-8℃保存，不要冷凍。

2、 保 質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒。

提示：酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣，酶標(biāo)板仍然正常有效，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請(qǐng)放心使用。

從2011年開(kāi)始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包及論文潤(rùn)色服務(wù)，協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色，是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無(wú)法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯(lián)系。

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：